推荐产品
公司新闻/正文
免疫组化过程中为何要对抗原修复?
人阅读 发布时间:2017-10-24 10:55
组织在制作过程中,由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来。为了解决上述的问题,利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来。
A:抗原热修复
a 高压热修复 在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液(ph6.0).盖上不锈钢锅盖,但不能锁定。将玻片置于金属染色加上,缓慢加压,是玻片在缓冲液中浸泡五分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来。10分钟后除去热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。
b 沸热修复 电炉或水浴锅加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。
c 微波炉加热 在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至沸腾后将组织芯片放入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次。
B:酶消化方法
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液;胰蛋白酶使用前预热37℃,消化时间为5-30min。
更多实验详情请登入ABclonal官网进行咨询。
A:抗原热修复
a 高压热修复 在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸橼酸钠缓冲溶液(ph6.0).盖上不锈钢锅盖,但不能锁定。将玻片置于金属染色加上,缓慢加压,是玻片在缓冲液中浸泡五分钟,然后将盖子锁定,小阀门将会升起来。10分钟后除去热源,置入凉水中,当小阀门沉下去后打开盖子。此方法适用于较难检测或核抗原的抗原修复。
b 沸热修复 电炉或水浴锅加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至95℃左右,放入组织芯片加热10-15分钟。
c 微波炉加热 在微波炉里加热0.01枸橼酸钠缓冲液(ph6.0)至沸腾后将组织芯片放入,断电,间隔5-10分钟,反复1-2次。
B:酶消化方法
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液;胰蛋白酶使用前预热37℃,消化时间为5-30min。
更多实验详情请登入ABclonal官网进行咨询。